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LysoSensor Green DND-189具有较低的pKa值，仅在酸性区室内才具有荧光。本制品以溶于无水DMSO的1mM储存液形式提供。如对活细胞中的酸性区室进行选择性标记和染色，可选择LysoTracker系列探针。

LysoSensor系列探针是主要对活细胞中的酸性区室(如溶酶体、顶体精子)动态合成和功能进行研究的一类荧光探针，该类探针的染色具有向酸性，可通过质子化作用在酸性细胞器内累积。该类探针的这种质子化作用还可解除染料的荧光淬灭性，使其所发射的荧光强度更强。因此，与LysoTracker系列探针相比，LysoSensor系列探针随着细胞器的酸化程度其荧光强度呈pH依赖型(向酸)增强。

分子式	C24H22N4O2
分子量	398.46
光谱特性	Ex/Em=443/505nm
pKa	～5.2
荧光颜色	绿色
结构式

组分	规格
LysoSensor Green DND-189	50μL
说明书	1份

保存：-20℃，干燥避光，避免反复冻融，有效期6个月。

• 不能储存在无霜冰箱，建议按照单次用量分装于-20℃冻存。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 本制品仅作科研用途！

使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。

• 工作液的配制
  利用培养基或合适的缓冲液将1mM储存液稀释至工作浓度，推荐工作液浓度至少为1μM；
  注：
  ① 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
  ② 若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育，会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
  ③ 工作液现配现用。
  
• 染色
  
  • 对于贴壁细胞
    
    • 将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
      
    • 待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min～2h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
      
    • 利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
  • 对于悬浮细胞
    
    • 离心，吸除上清。
      
    • 利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育30min～2h(具体时间需根据细胞类型而定)。
      
    • 离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
      
    • 置于荧光镜下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或加长染色时间。
      注：对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上，然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。

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